在当前CAR-T细胞治疗日益成熟的背景下，准确评估CAR在T细胞表面表达水平变得尤为重要。这不仅是临床前质控和放行标准的关键环节，也是疗效预测的重要组成部分。作为最直观的评估指标，“CAR阳性率”（%CAR⁺）通常通过流式细胞术、ELISA等技术检测CAR与靶抗原的结合能力。为了更好地监测CAR的表达情况，研究人员采用了多种类型的试剂，各有不同的优缺点。

Protein L是常用的通用性检测试剂，能够与抗体的κ轻链结合，适用于多种靶点构建的CAR-T细胞。然而，其识别范围有限，仅能检测人源VκⅠ、VκⅢ和VκⅣ亚型以及鼠源VκⅠ亚型，不能识别VκⅡ亚型和多数鼠源Ig的其他亚型轻链，因此在某些情况下存在检测盲区。

另一方面，Anti-Fab抗体则能够识别抗体Fab区域，适合用于检测不同靶点的CAR构建。但由于通常来源于多克隆抗体，导致背景值较高，批间差异性大，影响数据的重复性与准确性。相比之下，Anti-idiotype抗体具有高特异性和高灵敏度，能直接识别scFv结构中的抗原结合位点，成为CAR特异性检测的理想选择。然而，由于其稀缺性，这类抗体通常需要定制开发，开发周期长达6个月，因此不适用于快速筛查或质控流程。

此外，靶点蛋白作为检测工具也是一种常用策略，能够利用CAR结构中的scFv与目标抗原的结合特性进行检测。尽管这种方法专属性强，但其灵敏度受到scFv与靶蛋白之间亲和力的影响，亲和力较弱时可能导致信号不明显或假阴性。靶点蛋白的纯度和构象同样会直接影响检测结果，这使得准确检测变得复杂。目前在此背景下，寻求一种既简便又稳定的天然构象跨膜蛋白展示策略显得尤为亟需。

为此，PeptiNanodisc平台应运而生，其短肽自组装的独特机制，为跨膜蛋白在CAR检测中的展示提供新的解决方案。PeptiNanodisc通过两段人工设计的amphipathicα-肽包裹目标膜蛋白，形成不需要额外脂质或膜支撑蛋白的纳米盘。该技术可稳定重构多种膜蛋白，尤其适合呈现天然构象的跨膜靶点，进而用于CAR-T细胞的功能研究。

PeptiNanodisc不仅能够将靶抗原重构为类似原生构象，而且对于结构复杂的膜蛋白，其跨膜区域和结构域间的空间关系得以良好保留，显著还原了其在细胞膜上的三维状态。这意味着CAR分子识别的不再是“蛋白碎片”，而是完整的靶标，如同其在肿瘤细胞表面那样。该技术提高了CAR与目标结合的亲和力与特异性，从而显著提升检测阳性率，降低假阴性风险。

传统融合蛋白在体外环境中容易聚集和变性，导致实验结果重复性差。而重构后的PeptiNanodisc抗原则具备良好的热稳定性和一致性，在多种检测条件下（如37°C孵育、4°C储存、冻融）均表现出色。由于不存在脂质背景、Fc区及非特异性标签，PeptiNanodisc有效提高了流式细胞术和ELISA等免疫检测平台的信噪比，确保结果更加清晰和可靠。

PeptiNanodisc不仅支持多种标签（如Strep、FLAG）及功能修饰（如荧光标记、biotin标记），还能适用于大规模生产及自动化检测平台，利于质控流程的标准化。其核心成分为人工合成的短肽，来源明确、结构稳定，减少了批间差异和制备难度。这样的"合成可控"方式，尤其适合于对CAR阳性率进行精确评估。

通过这种创新技术，PeptiNanodisc真正解决了“如何让CAR识别正确抗原”的核心问题，使CAR-T细胞检测从“看得见”走向“看得准”，为CAR产品的质控与结构优化提供了更真实、稳定和可靠的技术支撑。从而确保了在生物医疗领域，特别是以尊龙凯时为代表的品牌在CAR-T细胞治疗中的领先地位和技术优势。