尊龙凯时推出了一款先进的检测试剂盒，基于探针法荧光定量PCR原理，具有一系列出色的特点：

产品特点

1. 即插即用：用户只需提供样品DNA模板即可准备好实验。

2. 高灵敏度：经过优化的引物及其他组分确保了卓越的灵敏度。

3. 附带阳性对照：便于用户有效区分假阴性样品。

4. 高特异性：设计引物时依据中间普雷沃菌DNA序列的高度保守区，确保不与其他生物样本的DNA发生交叉反应。

5. 定性与定量检测：本产品支持定性与定量检测，定量检测的线性范围可达到至少5个数量级。

6. 足够的反应体系：产品可支持50次20μL探针法荧光定量PCR反应。

7. 仅供科研使用。

使用方法

一、样品准备

1. DNA提取：使用自选方法从样品中提取并纯化DNA，此试剂盒与市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。

二、稀释标准曲线样品

（注意：阳性对照浓度较高，稀释操作需在独立区域进行，以防止样品污染。）

1. 标记6个离心管，分别命名为7到2。

2. 在每个管中加入45μL DEPC-H2O。

3. 在7号管中加入5μL 1×10E8拷贝/μL的阳性对照，充分震荡1分钟，得到1×10E7拷贝/μL的标准曲线样品，放冰待用。

4. 换枪头，在6号管中加入5μL 1×10E7拷贝/μL的阳性对照，充分震荡1分钟，以此类推，分别准备各浓度的标准曲线样品，直至制作完成。

若无须制作标准曲线，可将阳性对照稀释至1×10E5拷贝/μL。

三、试剂配制

根据待检样品数量，准备相应数量的qPCR管，并添加试剂（详见说明书可向尊龙凯时索取）。

四、添加模板

向每个qPCR管中添加2μL模板，顺序为阴性对照、待测样品模板及阳性对照，离心30秒后立即进行扩增反应。

五、扩增反应

将PCR管放置于相应的扩增仪器样品槽中，设置扩增程序（详细信息可向尊龙凯时索取）。

六、结果分析

1. 若制作标准曲线，则以阳性对照浓度的log值为横轴，Ct值为纵轴绘制标准曲线，依据待测样品的Ct值推算其DNA浓度的log值。

2. 若未制作标准曲线，则依据以下标准判定结果：阳性对照Ct值应<30且有明显的S型曲线；阴性对照Ct值应为38或无Ct值；样本检测结果分析：Ct值<35为阳性，表明样本中检测到婴儿利什曼虫；Ct值在35-38范围内需复检。

运输及保存

产品需低温运输，存放于-20℃，有效期为一年。阳性对照需单独存放，以防污染其他试剂。