胎牛血清的标准储存温度为-20℃，如需长期保存，可以选择-80℃环境。在解冻过程中，建议不要直接将其放置于常温（25-37℃）中，因为这可能会导致絮状沉淀，进而影响血清的品质。推荐的解冻方式是将其从-20/-80℃转移至4℃，待其完全融化为液体后，再将其转移至室温。在解冻过程中，应定期晃动，以确保血清内部成分和温度均匀混合，从而减少沉淀的产生。

解冻后的血清可分装在15mL或50mL的无菌离心管中进行冻存。根据使用频率，可以在4℃存放一管解冻后的血清，以便于频繁配制培养基。不过，在4℃储存的时间不宜过长，最好在一个月内用完。切记，解冻后的胎牛血清不应在37℃或常温下存放过久，以防止重要的细胞生长因子的失活，从而影响细胞的状态。

在添加血清时，通常建议添加量为5%、10%或20%。绝大部分细胞的正常培养使用10%的血清浓度，部分细胞在原代提取时可使用20%的血清。而具体某一株细胞适应的血清浓度，应根据其特性和实验目的进行探究。

热灭活一般是将已解冻的血清在56℃下处理30分钟，以去活化补体。补体参与的反应包括溶细胞活性、平滑肌收缩、肥大细胞和血小板组胺释放，以及增强吞噬作用等。但是，通常情况下，热灭活对大多数细胞培养并不是必须的步骤。经过热灭活的血清对细胞生长的效果有限，反而高温处理可能会影响血清质量，进而影响细胞生长速率和增加沉淀物。

在细胞培养中，常会遇到需要更换血清的情况。直接更换其他血清可能导致细胞适应不良，表现为增殖速率减慢或逐渐脱壁。一般情况下，更换血清时应遵循梯度替换，以帮助细胞逐步适应新环境。例如，首次更换时可以按照新旧血清1:3的比例，第二次1:1，第三次3:1，最终完全更换。

如果解冻后发现有少量乳白色的絮状或点状物质，大多是由于脂蛋白变性和纤维蛋白形成的沉淀，这些并不会影响血清质量。可以通过400×g离心5分钟后取上清，通常不会对细胞产生重大影响。值得一提的是，厂家提供的血清通常是无菌的，无需再进行过滤。如果发现血清中有悬浮物，应将其加入培养液中一起过滤，不宜直接过滤血清。

在细胞培养过程中出现黑点时，需先观察培养基是否混浊，以及黑点是否在不规则游动。如果培养基迅速变黄、混浊，可能是细胞受到污染（如细菌或支原体）。如果在显微镜下观察细胞状态良好且与黑点出现前无变化，则黑点的原因可能与：1) 细胞自然破碎后的残骸；2) 血清中杂蛋白，可能是反复冻融的结果；3) 配制培养基的水质、容器不合格有关。应用离心或过滤法去除这些黑点；此外，若原代细胞中出现小黑点，可能是由于原代组织中的杂质，经过多次传代可逐步消除。

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