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尊龙凯时人胸腺活化调节趋化因子TARC Elisa试剂盒使用指南

发布时间:2025-03-09   信息来源:尊龙凯时官方编辑

本试剂盒专为科学研究设计,不可用于医学诊断。本文将详细介绍人胸腺活化调节趋化因子(TARC)ELISA试剂盒的使用说明和检测原理。

尊龙凯时人胸腺活化调节趋化因子TARC Elisa试剂盒使用指南

检测原理

该试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预先涂覆有adropin(AD)抗体的微孔板中,依次添加样本、标准品及HRP标记的检测抗体,经过适当的温育和彻底洗涤后,加入TMB底物,经过过氧化物酶的催化,TMB转化为蓝色,后又在酸的作用下变为最终的黄色。这一颜色变化与样本中的adropin(AD)浓度成正比。最后,通过酶标仪在450nm波长下测量吸光度(OD值),以计算样本的浓度。

样品收集、处理及保存方法

1. 血清:使用不含热源和内毒素的试管,操作时避免细胞刺激。采集血液后,以3000转/分钟离心10分钟,迅速小心地分离血清与红细胞。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,对样本进行3000转/分钟离心30分钟后取上清。
3. 细胞上清液:进行3000转/分钟离心10分钟以去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水混合并捣碎,随后以3000转/分钟离心10分钟,取上清。
5. 保存:若未能及时检测样本,应按一次用量分装并冻结于-20℃,避免反复冻融。样本在室温下解冻时需确保均匀彻底。

操作注意事项

试剂盒组成包括标准品(S0-S5),其浓度依次为:0、25、50、100、200、400 pg/mL。

试剂的准备

将20×洗涤缓冲液按1:20比例稀释,即1份20×洗涤缓冲液与19份蒸馏水混合。

洗板方法和操作步骤

在操作完成后,通过Excel绘制标准曲线,以标准品浓度为横坐标,对应的OD值为纵坐标,从而形成标准品的线性回归曲线,并依据曲线方程计算各样本的浓度值。

免责声明

使用本试剂盒前,请详阅相关说明,以确保严格遵循操作规程。品牌尊龙凯时旨在为科研工作者提供高品质的产品和服务,同时确保符合相关的科学研究标准。