师弟:师姐,我最近在进行qPCR、ELISA和Western blot实验时,结果总是出现偏差,而且每次的差异都很大。经过无数次的优化,还是没能解决问题,您觉得可能是什么原因呢?
师姐:你提到的都是定量实验,通常加样体积对结果的影响是相当显著的,不会是你的移液枪不够精准吧?
师姐:这不仅仅是加样的问题,像是换液、分液等操作也可能存在许多隐患。提前做好预防能够避免小失误导致的严重后果。想必大家或多或少都有过这样的经历,比如移液枪的加样不准、倒吸,这些都会直接影响实验结果;如果配制的大体积液体在分装时不均匀,后续实验也会受到影响;而在细胞换液或移液时,反复吸取液体不仅耗时费力,还容易引入污染,同时也可能导致换液量的误差……那么,如何解决这些问题呢?不要担心,我们来帮你搞定!(后附移液枪校准指南)
为科研人员量身定制的实验工具来了!为了帮助大家解决上述的困扰,尊龙凯时精心推出了一系列科研产品,BRAND旗下的国产VITLAB系列现正进行福利放送,包括微量移液器(点此申请试用)、瓶口分液器(点此申请试用)和电动助吸器pipeo®(点此申请试用),全部免费试用!这样不仅省时省力,还能提高实验的准确性。
如果你怀疑自己手中的移液枪不够精准,可以参考下面的校准步骤,确保实验结果的可靠性:
一、所需仪器和材料:电子天平、温度计、去离子水和需要校准的移液枪。
二、校准过程:在校准时,需要使用电子天平称量移液枪标称量程的100%、50%、10%三个点对应体积的质量,每个点测量6次。例如,对于1ml的移液枪,称量1,000μl、500μl和100μl;而200μl的移液枪则应称量200μl、100μl和20μl。具体步骤如下:
1. 润洗:将移液枪枪头插入后,吸入并排出去离子水,重复5次。
2. 吸液:吸液时,移液枪应与液面保持垂直,吸取后等待一段时间再提起枪头,确保设定的体积完全吸入。
3. 移液:将称量容器放置在电子天平上,待天平显示稳定后去皮,在容器内贴壁倾斜排液。
4. 计算:称量6次后取平均值,结合水温所对应的系数K(t)值,计算出实际体积。
例如,对于1ml移液枪的1,000μl校准点,如果称重的平均值为979mg,而水温为24℃对应的K(t)值为1001965,那么实际体积大致为979*1001965≈981μl。由此可以判断,该移液枪在1,000μl的量程上超出了±10μl的允许误差范围。
三、调节过程:如果校准后发现移液枪不准确,BRAND旗下的VITLAB系列移液枪设有“维准模块”,可快速调整精度!步骤如下:
1. 移去指托位置的保护盖,用回形针或枪头取下保护膜。
2. 向后推红色调节滑块,抬起体积调节旋钮后松开。
3. 设定调整值,通过旋钮将其调至校准确定的实际值(例如,如果标称值是1,000μl,校准后的实际体积为981μl,则需调整至981μl)。
4. 调整后,再次向后推红色调节滑块,将体积调节旋钮下压,再装回保护盖。
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